制備色譜是以分離出純物質(zhì)為目的的色譜系統(tǒng),分析色譜是以分析出樣品組分信息為目的的色譜系統(tǒng),基于他們目的的不同,制備色譜相對于分析色譜有很多不同特征,不能簡單等同。
當(dāng)我們在實驗室中想得到納克乃至毫克級的純物質(zhì)時,稍微改裝下分析型色譜系統(tǒng)就能簡單輕松的完成,不過,若所需制備的純品量很大,此時,再用分析型色譜系統(tǒng)分離純化,可以預(yù)見這將是一場“災(zāi)難”。
制備色譜常用的色譜模式有低壓,中壓,高壓三種,以應(yīng)對不同類型和不同純度要求的樣品的分離,同時盡可能減少成本。
低壓:一般而言,低壓適合易分離化合物,但分離時間長很容易造成敏感化合物分解。
Flash:Flash是應(yīng)對低壓分離時間長而出現(xiàn)的替代方法,盡管其分辨率不及中壓,仍常被用于簡單的分離問題。
中壓:中壓一般采用恒流泵提供恒定的流動相流速,填料顆粒更小,分辨率更高,耐受更高壓力和更快流速,同時操作與低壓和Flash基本一致,可以轉(zhuǎn)接到各類低壓和Flash系統(tǒng),進(jìn)一步為您節(jié)約儀器成本。
高壓:高壓通常在分離制備的最后階段采用,應(yīng)用于分離困難的樣品,純度甚至能達(dá)到99.9%。
在開發(fā)制備色譜方法時,很多人都存在這樣的錯誤認(rèn)識,認(rèn)為制備色譜的流動相純度不需要優(yōu)先考慮,分析用色譜純,制備馬馬虎虎就行了,不過我們從另一方面思考下,制備過程中流動相的使用量一般都很大,其中的雜質(zhì)積聚后,對產(chǎn)品的純度影響將會十分可觀。