液相色譜主要用于對(duì)吸收紫外線的液態(tài)有機(jī)物(不飽和有機(jī)物)進(jìn)行定性、定量分析和純度分析,定性,是保留時(shí)間的特征峰值。沒(méi)有辦法分析物質(zhì)結(jié)構(gòu),但如果已知的物質(zhì)是x,則要測(cè)量的物質(zhì)可以與x標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)比較。液相色譜測(cè)定表明,該物質(zhì)的停留時(shí)間相同,測(cè)定結(jié)果表明,該物質(zhì)主要用于測(cè)試中的色譜鑒定。
影響
液相色譜儀分離度的因素有色譜柱填充性能、流動(dòng)相和流速等。
一、色譜柱填充性能:
液相色譜柱的分離性能由固定相粒度、柱長(zhǎng)和柱壓降(由柱內(nèi)徑和柱填充狀況決定)決定,這三個(gè)參數(shù)度也決定了樣品組分的保留時(shí)間。保留時(shí)間不僅與色譜過(guò)程的熱力學(xué)因素k有關(guān),還與決定柱效和分離度的柱性能參數(shù)及流動(dòng)相的粘度有關(guān),這些參數(shù)都是影響色譜分離過(guò)程動(dòng)力學(xué)的重要因素。
在液相色譜中,色譜柱的制備是一項(xiàng)技術(shù)要求非常高的工作。
二、流動(dòng)相:
液相色譜中,改變淋洗液組成和極性是改善分離的最直接因素,不可能通過(guò)增加柱溫來(lái)改善傳質(zhì)。因此,液相色譜大多是恒溫分析。流動(dòng)相選擇在液相色譜中顯得特別重要,流動(dòng)相可顯著改變組分的分離狀況。
三、流速:
流速大于0.5cm/s時(shí),H-u曲線是一段斜率不大的直線。降低流速,柱效提高不是很大。但在實(shí)際操作中,流量仍是一個(gè)調(diào)整分離度和出峰時(shí)間的重要參數(shù)。